Kalkulačka koncentrácie bielkovín

Autor: Henrick Yau
- July 21, 2026
| |

Kalkulačka koncentrácie bielkovín

Typické hodnoty sa pohybujú od 0,5 do 2,0
Štandardné kyvety majú dĺžku dráhy 1 cm
Ak bola vzorka pred meraním nariedená (napr. 5 = riedenie 1:5)

Koncentrácia proteínu pomocou absorbancie pri 280 nm (A280) sa určuje pomocou Lambert-Beerovho zákona:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

kde:

  • \( C \) = Koncentrácia proteínu (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbancia pri 280 nm
  • \( \epsilon \) = Extinkčný koeficient (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Dĺžka dráhy kyvety (cm)

Čo je kalkulačka koncentrácie proteínu?

Kalkulačka koncentrácie proteínu pomáha určiť koncentráciu proteínu pomocou rôznych metód, vrátane:

  • Absorbancia pri 280 nm (A280): Rýchla a nedeštruktívna metóda založená na aromatických aminokyselinách.
  • Bradfordova metóda: Kolorimetrická metóda využívajúca väzbu farbiva.
  • BCA (Bicinchoninic Acid) metóda: Metóda založená na redukcii medi a kolorimetrickej detekcii.
  • Lowryho metóda: Dobre zavedený prístup využívajúci interakcie proteínu s meďou.

Ako používať kalkulačku

Postupujte podľa týchto krokov na výpočet koncentrácie proteínu:

  • Vyberte metódu merania (A280, Bradford, BCA alebo Lowry).
  • Zadajte požadované hodnoty, ako je absorbancia, faktor riedenia a extinkčný koeficient (ak je potrebný).
  • Ak používate metódu štandardnej krivky (Bradford, BCA alebo Lowry), zadajte parametre krivky.
  • Kliknite na tlačidlo "Vypočítať" pre získanie výsledku koncentrácie.

Výhody používania kalkulačky

  • Šetrí čas automatizáciou výpočtov koncentrácie.
  • Podporuje viacero metód merania pre flexibilitu.
  • Obsahuje kalkulačku riedenia na prípravu špecifických koncentrácií.
  • Znižuje ľudské chyby pri manuálnych výpočtoch.

Často kladené otázky

1. Aká presná je metóda absorbancie (A280)?

Metóda A280 je vo všeobecnosti presná pre čisté proteíny, ale môže byť ovplyvnená kontaminantmi, ako sú nukleové kyseliny.

2. Môžem použiť Bradfordovu metódu pre všetky proteíny?

Bradfordova metóda funguje dobre pre väčšinu proteínov, ale môže poskytovať variabilné výsledky v závislosti od zloženia proteínu.

3. Aká je výhoda BCA metódy?

BCA metóda je kompatibilnejšia s detergentmi a má širší lineárny rozsah ako Bradfordova metóda.

4. Ako vybrať správny extinkčný koeficient pre A280?

Použite publikované hodnoty pre známe proteíny alebo vypočítajte extinkčný koeficient na základe zloženia aminokyselín.

5. Prečo potrebujem faktor riedenia?

Ak je vaša vzorka pred meraním zriedená, musíte vynásobiť vypočítanú koncentráciu faktorom riedenia, aby ste získali správnu konečnú koncentráciu.